WWW.LIBRUS.DOBROTA.BIZ
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - собрание публикаций
 

«(МГС) INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION. METROLOGY AND CERTIFICATION (ISC) ГОСТ МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ 34472СТАНДАРТ МОЛОКО СЫРОЕ Турбидофлуориметрический экспресс-метод определения бактериальной ...»

МЕЖ ГОСУДАРСТВЕННЫ Й СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

(МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION. METROLOGY AND CERTIFICATION

(ISC)

ГОСТ

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

34472СТАНДАРТ

МОЛОКО СЫРОЕ

Турбидофлуориметрический экспресс-метод определения бактериальной обсемененности И здание оф и ц и а л ьн о е РКЮ Мщ Ш СтандартИ1фцм проект строительства ГОСТ 34472— 2018 П ре д исловие Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стан­ дартизации установлены в ГОСТ 1.0—2015 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2—2015 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосудар­ ственные. правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, при­ нятия. обновления и отмены»

С ведения о стандарте 1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом маслоделия и сыроде­ лия — филиалом Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный научный центр пищевых систем им. В.М. Горбатова» РАН (ВНИИМС — филиал ФГБНУ «ФНЦ пищевых систем им. В.М. Горбатова» РАН) 2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии 3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 28 сентября 2018 г. Me 112-П)

За принятие проголосовали:

Краткое н а и м е н о в а н и е с тр аны К о д с тр аны по С о кр а щ е н н о е н а и м е н о в а н и е н а ц и о н а л ьн о го гк М К (И С О 3 1 6 6 ) 0 0 4 - 9 7 М К (И С О 3166 ) 004 - 9 7 орга на по с та н д а р ти за ц и и Беларусь BY Госстандарт Республики Беларусь Киргизия KG Кыргызстандарт Россия RU Росстандарт Таджикистан TJ

–  –  –

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 10 октября 2018 г. № 745-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 34472— 2018 введен в действие в качестве на­ ционального стандарта Российской Федерации с 1 января 2020 г .

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информаци­ онном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www. gost.ru)

–  –  –

1 Область применения

2 Нормативные ссылки

3 Термины и определения

4 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда и м а те ри ал ы

5 Отбор проб

6 Условия проведения измерений

7 Определение бактериальной обсемененности сырого молока

8 Обработка результатов

9 Требования безопасности

Приложение А (справочное) Рекомендуемые средства измерений, вспомогательное оборудование и материалы................. 6 Приложение Б (справочное) Валидация турбидофлуориметрического приборного экспресс-метода определения бактериальной обсемененности сырого молока с арбитражным методом определения КМАФАнМ по ГОСТ 32901





Библиограф ия

ГОСТ 34472— 2018

М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й С Т А Н Д А Р Т

МОЛОКО СЫРОЕ

–  –  –

1 О бласть пр им е не н ия Настоящий стандарт распространяется на приборный турбидофлуориметрический экспресс-ме­ тод определения бактериальной обсемененности сырого молока по интенсивности флуоресценции ве­ ществ, образующихся из флуорогемиого субстрата, в процессе жизнедеятельности микроорганизмов .

Диапазон измерения бактериальной обсемененности сырого молока — от 2 • 10* до 5 • 10е КОЕ/см3 .

2 Н о р м а тив ны е с с ы л ки В настоящем стандарте применены нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.0 .

004—2015 Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопас­ ности труда. Общие положения ГОСТ 12.1.004—91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования ГОСТ 12.1.007—76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классифика­ ция и общ ие требования безопасности ГОСТ 12.1.019—79* Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие тре­ бования и номенклатура видов защиты ГОСТ 12.4.009—8 3 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объ­ ектов. Основные виды. Размещение и обслуживание ГОСТ 26809.1— 2014 Молоко и молочная продукция. Правила приемки, методы отбора и подго­ товка проб к анализу. Часть 1. Молоко, молочные, молочные составные и молокосодержащие продукты ГОСТ 27752—88 Часы электронно-механические кварцевые настольные, настенные и часы-бу­ дильники. Общие технические условия ГОСТ 28498—90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний ГОСТ 29227—91 (ИСО 835-1— 81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные .

Часть 1. Общие требования ГОСТ 32901— 2014 Молоко и молочная продукция .

Методы микробиологического анализа ГОСТ ИСО 5725-6— 2002** Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов из­ мерений. Часть 6. Использование значений точности на практике П р и м е ч а н и е — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства * В Российской Федерации действует ГОСТ Р 12.1.019—2009 «Система стандартов безопасности труда .

Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты» .

** В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-6—2002 «Точность (правильность и прецизион­ ность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике» .

Издание официальное ГОСТ 34472— 2018

по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам еже­ месячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год .

Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (изменен­ ным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, е котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку .

3 Т ерм ины и определения В настоящем стандарте применены термины в соответствии с [1), а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 бактер иа льн а я обсе м е н е нн о сть : Количество аэробных, факультативно-анаэробных и ана­ эробных микроорганизмов, способных проявлять свою жизнедеятельность в сыром молоке при темпе­ ратуре 30 °С .

П р и м е ч а н и е — Количество меэофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ) — это количество микроорганизмов, вырастающих и образующих видимые колонии на твердом пита­ тельном агаре при температуре (30 ± 1) °С .

В сыром молоке подавляющее количество микрофлоры представлено мезофильными аэробными и факуль­ тативно-анаэробными микроорганизмами. При посеве сырого молока на определение КМАФАнМ не учитываются анаэробные бактерии, количество которых ничтожно по сравнению с общим количеством выявляемых микроор­ ганизмов. Поэтому разницей между показателями бактериальной обсеменвнности и КМАФАнМ в сыром молоке следует пренебречь .

3.2 ту р б и д о ф л уо р и м е тр и я : Оптическая технология, используемая для измерения низких зна­ чений флуоресценции в мутных растворах биологических жидкостей, в том числе молоке .

П р и м е ч а н и е — Математическая и статистическая обработка динамических значений концентрации флу­ оресцентного продукта на основе кинетики и стехиометрии микробного роста позволяют точно рассчитать биомас­ су микроорганизмов .

3.3 тур б и д о ф л уо р и м е тр : Оптический сенсор, предназначенный для фиксации динамических измерений интенсивности светорассеяния и флуоресценции при заданной температуре в мутных рас­ творах биологических жидкостей, в том числе молоке .

4 С редства изм ерений, в сп о м о га те л ь н о е о б оруд о ван ие, посуда и м атер иалы Турбидофлуориметр’ с диапазоном рабочих длин волн от 400 д о 650 нм. диапазоном измерений формазиновой суспензии от 100 до 1000 ЕМФ. рабочим диапазоном температуры режима термостатироваиия от 30 °С до 43 °С и соответствующим программным обеспечением* .

Тест-наборьГ для определения бактериальной обсеменвнности в сыром молоке диапазоном из­ мерения от 2 • 104 до 5 10е КОЕ/см3 .

Дозаторы пипеточные одноканальные переменного объема от 0.02 до 2 см3 .

Термометр стеклянный жидкостный (не ртутный) по ГОСТ 28498 диапазоном измерения от 0 °С до 100 °С и ценой деления шкалы 1 °С .

Подогреватель оптический облучающий, обеспечивающий поддержание температурного режима в диапазоне от 25 С до 40 °С .

С Часы по ГОСТ 27752. секундомер или таймер .

Встряхиватель вибрационного типа со скоростью вращения до 3000 об/мин .

Контрольный образец для контроля тест-наборов* .

Пробирки пластиковые среднестенные с плоской крышкой стерильные (типа Эппендорф) вмести­ мостью 1.5 см3 .

Пипетки градуированные 1(2)— 1(2)— 1— 2 по ГОСТ 29227 .

Допускается применение другого оборудования, не уступающего вышеуказанным по метрологи­ ческим и техническим характеристикам и обеспечивающего необходимую точность измерения, а также материалов по качеству не хуже вышеуказанных .

–  –  –

5 О тбор проб

5.1 Основные понятия и общие правила отбора проб — по ГОСТ 26809.1 .

5.2 Отбор проб сырого молока при проведении микробиологических анализов проводят перед от­ бором проб для физико-химических и органолептических анализов в соответствии с ГОСТ 32901 .

При контроле бактериальной обсемененности турбидофлуориметрическим методом из объеди­ ненной пробы сырого молока, предназначенной для проведения микробиологических анализов объ­ емом не менее 500 см3, отбирают пробу для анализа объемом от 50 до 100 см3 в соответствии с ГОСТ 32901 (раздел 5) .

Перед отбором проб сырое молоко должно быть тщательно перемешано .

5.3 Пробы сырого молока не подлежат консервированию и хранению. Их анализируют непосред­ ственно после отбора для получения более объективных результатов измерений .

6 Условия п р о ве д е ни я изм ерений

При выполнении измерений следует соблюдать следующие условия:

- температура окружающего в о зд у х а

- относительная влажность в о зд уха

- атмосферное д ав л е ни е

7 О пределение ба кте р и а л ьно й о б сем ененности с ы р о го молока

7.1 С ущ н о сть метода Метод основан на измерении скорости образования флуоресцентных веществ из флуорогенных субстратов в результате жизнедеятельности микроорганизмов. Скорость изменения флуоресцен­ ции прямо пропорциональна биомассе жизнеспособных микроорганизмов в сыром молоке. Исходя из средней массы бактериальной клетки, равной 1 пг. программное обеспечение прибора трансформи­ рует значение биомассы в наиболее вероятное число клеток микроорганизмов (НВЧ/см3): биомасса (пг) = НВЧ/см3 = КОЕ/см3 .

7.2 П од го товка к пр о в е д е н и ю изм ерений

7.2.1 П од го товка к работе турб и д о ф л уор им е тра Турбидофлуориметр располагают вдали от источников тепла и сильного электромагнитного из­ лучения. избегая попадания на него прямых солнечных лучей .

Подготовку турбидофлуориметра и его эксплуатацию следует проводить в соответствии с реко­ мендациями инструкции или паспорта на прибор .

Перед выполнением измерений проводят холостую пробу для регистрации фоновых значений в соответствии с инструкцией к прибору .

7.2.2 П од го товка те ст-н абор ов 7.2.2.1 При хранении тест-наборов при температуре от 4 X до 10 °С до начала выполнения из­ мерений тест-набор с пробирками необходимо выдержать в помещении при комнатной температуре для их отепления .

Перед выполнением измерений реагенты в тест-пробирке активируют путем встряхивания .

7.2.2 2 Проверку тест-набора следует проводить ежемесячно, либо при появлении сомнительных результатов .

Контроль качества тест-пробирок, входящих в тест-набор, и правильности выполнения процедуры измерения осуществляют согласно инструкции по эксплуатации, используя контрольный образец сухих реагентов, поставляемых вместе с прибором .

7.3 П роведение изм ерений

7.3.1 Перед началом измерения пробу для анализа исследуемого сырого молока, предваритель­ но нагретого до комнатной температуры, тщательно перемешивают до получения максимально одно­ родного распределения клеток микроорганизмов в объеме пробы. Точность дальнейшего измерения во многом определяется однородностью распределения клеток микроорганизмов в пробе молока .

ГОСТ 34472— 2018 7.3.2 С помощью дозатора или стерильной мерной пипеткой отбирают 1.3 см3 сырого молока, которое помещают в микропробирку и перемешивают на встряхивателе вибрационного типа в тече­ ние 15 с .

Подогрев сырого молока в микропробирке до температуры (30 ± 2) °С (или температуры, указан­ ной в документах изготовителя тест-наборов по определению общего количества микроорганизмов) проводят в течение 10 мин в оптическом облучающем подогревателе .

7.3.3 Подогретую пробу сырого молока из микропробирки переливают в предварительно активи­ рованную тест-пробирку и плотно закрывают крышкой. Объем сырого молока в активированной тестпробирке должен быть не менее 1,2 см3 .

7.3.4 Перед началом измерения визуально оценивают цвет сырого молока в тест-пробирке .

Появление розовой окраски различной интенсивности свидетельствует о высокой бактериальной обсемененности. превышающей диапазон измерения. Такое сырое молоко не подлежит дальнейшему контролю .

7.3.5 Содержимое тест-пробирки с пробой сырого молока перед началом измерений перемеши­ вают на встряхивателе вибрационного типа в течение 10— 15 с. Тест-пробирку с перемешанной пробой сырого молока помещают в турбидофлуориметр и плотно закрывают крышку прибора .

В зависимости от степени обсемененности молока время измерения составляет от 8 д о 20 мин .

После завершения измерения результат появится на мониторе в протоколе испытаний .

7.3.6 Проводят два параллельных измерения .

При этом важно соблюдать последовательность выполнения измерений согласно 7.3.1— 7.3.5 .

8 О бработка результатов

8.1 За результат измерений принимают среднеарифметическое значение результатов двух па­ раллельных измерений, выполненных в условиях повторяемости, если выполняется условие приемле­ мости (1) .

В случае если бактериальная обсемененность составляет менее 2 104 КОЕ/см3 (т. е. резуль­ тат находится за пределами нижней границы диапазона измерений), то результат записывают «менее 2 • 104 КОЕ/см3» .

В случае если бактериальная обсемененность молока превышает верхнюю границу диапазона измерений, то результат записывают «более 5 • 10б КОЕ/см3» .

Данные валидации турбидофлуориметрического приборного экспресс-метода определения бактериальной обсемененности сырого молока с арбитражным методом определения КМАФАнМ по ГОСТ 32901 приведены в приложении Б .

–  –  –

где БО, и Б 0 2 — значения двух параллельных измерений, полученные в условиях повторяемости .

КОЕ/см3;

г — предел повторяемости, значение которого приведено в таблице 1, КОЕ/см3 .

Если условие (1) не выполняется, то проводят повторные измерения и проверку приемлемости результатов измерений в условиях повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО 5725-6 (подраздел 5.2) .

При повторном превышении указанного значения выясняют причины, приводящие к неудовлетво­ рительным результатам анализа .

8.3.2 П роверка пр ие м л ем ости результатов изм ерений, п о л у ч е н н ы х в у с л о в и я х в о с п р о и з ­ вод им ости Проверку приемлемости результатов измерений бактериальной обсемеиенности, полученные в условиях воспроизводимости (т = 2), проводят в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО 5725-6 (под­ раздел 5.3) .

Результаты измерений, выполненные в условиях воспроизводимости, считаются приемлемыми, если выполняется условие | 6 0 3 - ВОА\ S R. (2) где БОэ и Б 0 4 — значения двух параллельных определений бактериальной обсемеиенности, получен­ ные в условиях воспроизводимости. КОЕ/см3;

R — предел воспроизводимости, значение которого приведено в таблице 1, КОЕ/см3 .

9 Т ребования б е зопасности

9.1 При выполнении работ необходимо соблюдать следующие требования:

- требования техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007;

- требования техники безопасности при работе с электроустановками в соответствии с ГОСТ 12.1.019 .

Организация обучения работающих безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004 .

Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности в соот­ ветствии с ГОСТ 12.1.004 и быть оснащено средствами пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009 .

–  –  –

К выполнению измерений допускаются лица с образованием не ниже среднего, имеющие опыт ра­ боты в химической или микробиологической лаборатории, освоившие методику выполнения измерений и изучившие инструкцию по эксплуатации турбидофлуориметра .

ГОСТ 34472— 2018

–  –  –

А.1 Рекомендуемые средства измерений, вспомогательное оборудование и материалы для воспроизводства методики измерений Турбидофлуориметр БиоТФ .

Тест-набор «СТАРТ» для определения общего количества микроорганизмов в сыром молоке диапазоном измерения от 2 - 104 до 5 10е КОЕ/см3 .

Программное обеспечение БиоТФ с приложением «СТАРТ» .

Контрольный образец для проверки тест-набора «СТАРТ» .

ГОСТ 34472—2018

–  –  –

Графическая зависимость для общего массива данных, полученных при определении бактериальной обсемененности молока арбитражным методом на среде КМАФАнМ и с использованием турбидофлуориметра. пред­ ставлена на рисунке Б.1 .

Рисунок Б.1 — Зависимость между результатами содержания КМАФАнМ и результатами, полученными с исполь­ зованием турбидофлуориметра БиоТФ (л = 137) Представленные на рисунке Б.1 данные свидетельствуют о линейной зависимости между показателями бак­ териальной обсемененности. полученными турбидофлуориметрическим экспресс-методом, и результатами опре­ деления КМАФАнМ. полученными арбитражным методом по ГОСТ 32901. в диапазоне от 104 до 107 КОЕ/см^ .

Уравнение линейной зависимости у = 1.025х- 0,0281. (Б.1) .

Коэффициент линейного уравнения (основной критерий сходимости методов) равен 1.025. Свободный член линейного уравнения (0.0281) несет информацию о сдвиге методов .

Так как коэффициент линейного уравнения близок к единице, а свободный член — к нулю, можно говорить о высокой сходимости методов определения бактериальной обсемененности приборным экспресс-методом с ис­ пользованием турбидофлуориметра и показателя КМАФАнМ. определяемого арбитражным чашечным методом в соответствии с ГОСТ 32901 .

ГОСТ 34472— 2018

–  –  –

УДК 637.127:006.354 МКС 67.100.10 Ключевые слова: сырое молоко, методы анализа, бактериальная обсемененность. турбидофлуориметр. тест-набор, контрольный образец, измерения БЗ 10—2018/43

–  –  –






Похожие работы:

«ПРИНЯТО: АО ВО Решение Педагогического Совета ХФ ГАОУ АО ВО "АГАСУ"g 2017г. N2:/ 01:) fJm D~Jj)/t:f1. Протокол N2 ПОЛОЖЕНИЕ о стипендиальном обеспечении студентов Харабалинского филиала Государственного автономного обра:ювательного учреждения Астраханской области высшего...»

«ЗАО "ПО "Спецавтоматика" Модификация V4 XQPSA XQPST XQPPB вольна о б ро я Д сер т и фика ц и я ОС03 ОП014 УСТРОЙСТВО СИГНАЛЬНОПУСКОВОЕ АВТОНОМНОЕ АВТОМАТИЧЕСКОЕ ДЛЯ УСТАНОВОК ПОЖАРОТУШЕНИЯ УСПАА-1 ПАСПОРТ ДАЭ 100.249.000-02 ПС Бийск 2008 ЗАО "ПО "Спецавтома...»

«Космический аппарат – носитель РСА "Кондор-Э" как основа радиолокационной космической системы "Кондор-ФКА" С.Э. Зайцев АО "ВПК "НПО Машиностроения",143966, г. Реутов, Московская обл., ул. Гагарина, 33, E-mail:Npoodka@mail.ru Космический аппарат "Кондор-Э" имеет бортовую радиолокационную станцию (РЛС) с синтезированной апертурой (РСА),...»

«ВЕНТИЛЯТОРЫ РАДИАЛЬНЫЕ СРЕДНЕГО ДАВЛЕНИЯ ВР 280-46 (ВЦ 14-46, ВР 300-45, ВЦ 9-55, ВР 9-55) ПАСПОРТ ТЕХНИЧЕСКОЕ ОПИСАНИЕ ИНСТРУКЦИЯ ПО ЭКСПЛУАТАЦИИ Россия, г. Москва тел.: +7(495)1500998, +7(495)7805551 www.ventinform.ru...»

«ПУТЕВОДИТЕЛЬ ДЛЯ БИЗНЕСА ПО РЕСПУБЛИКЕ ТАДЖИКИСТАН ЗА 2017 ГОД г. Душанбе, июнь 2018 года Содержание 1. Краткая информация делового климата Республики Таджикистан. _ 3 Электроэнергия и цветные металлы. 7 Машины, оборудование, материалы и запасные части. 14 Телекоммуникация. _ 14...»

«МЕТОДИКА ПОВЕРКИ Приборов для регулировки света фар модели LITE 1.1 выпускаемых фирмой МАНА, Германия г. Санкт-Петербург 1999 Настоящая Методика поверки распространяется на приборы модели LITE 1.1 производства фирмы МАНА, Германия, предназначенные для измерения угловых характеристик и силы света фа...»

«Группа компаний "Трансстрой" C T O -ГК "Трансстрой"-023-2007 Стандарт организации Применение грунтовых анкеров и свай с тягой из трубчатых винтовых штанг "Титан" Издание официальное Москва строительство коттеджей CTO-ГК "Граисс грой -023-2007 Стандартизация в Группе компаний "Трансстрой" СТАНДАРТ ОРГАНИЗАЦИИ Применение грунто...»

«Слюняев Андрей Юрьевич ЧИСЛЕННОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ СВЕРХЗВУКОВЫХ ТЕЧЕНИЙ ГАЗА НА ОСНОВЕ МОДИФИЦИРОВАННОГО МЕТОДА РАСЩЕПЛЕНИЯ 05.13.18 – математическое моделирование, численные методы и комплексы программ АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук Новосибирск, 2009 Работа выполнена в Институт...»







 
2019 www.librus.dobrota.biz - «Бесплатная электронная библиотека - собрание публикаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.