WWW.LIBRUS.DOBROTA.BIZ
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - собрание публикаций
 

«1,4 ISSN 2074-0212 1,2 0,8 0,6 0,4 0,2 t, мин C_мак C_ср C_мин ISSN 2074-0948 International Edition in English: Butlerov Communications Полная исследовательская публикация ...»

№12, том 26. 2011

D = 16

1,4

ISSN 2074-0212

1,2

0,8

0,6

0,4

0,2

t, мин

C_мак C_ср C_мин

ISSN 2074-0948

International Edition in English:

Butlerov Communications

Полная исследовательская публикация Тематический раздел: Биохимия культур растений .

Регистрационный код публикации: 11-26-12-16 Подраздел: Органическая химия .

Публикация доступна для обсуждения в интернет как материал “Всероссийской рабочей химической конференции “Бутлеровское наследие-2011”. http://butlerov.com/bh-2011/ УДК 577.123.:612.014.43. Поступила в редакцию 22 июня 2011 г .

Изучение фенолкарбоновых кислот каллусных культур лекарственных растений семейства araliaceae © Белых Юрий Вячеславович и Кириллова Надежда Васильевна*+ Кафедра биохимии. Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия .

Ул. проф. Попова, 14. г. Санкт-Петербург, 1977376. Россия Тел.: (812) 234-90-33. Факс: 234-60-44. Е-mail: kirillovanv47@mail.ru _______________________________________________

*Ведущий направление; +Поддерживающий переписку Ключевые слова: фенолкарбоновые кислоты, культура тканей лекарственных растений .

Аннотация Показано, что биомассы каллусных культур тканей Panax ginseng женьшеня японского, Panax quinqefolium женьшеня американского, Polyscias filicifolia полисциас папоротниколистного содержат значительное количество фенолкарбоновых кислот. В частности, было установлено, что в исследуемых культурах тканей лекарственных растений присутствуют хлорогеновая, кофейная, ванилиновая, п-оксикоричная, феруловая, веротрановая и салициловая кислоты. В культивируемых клетках Panax ginseng салициловая кислота отсутсвовала, а ее содержание в высушенных биомассах Panax quinqefolium и Polyscias filicifolia в несколько раз превышало содержание в них других фенол-карбоновых кислот .

Введение Широкий интерес исследователей к фенолкарбоновым кислотам обусловлен их высокой биологической активностью [1]. В последние десятилетия появились работы, выполненные на культурах растительных тканей и микроорганизмах, которые свидетельствуют об особой роли фенолкарбоновых кислот. В частности, показано, что фенолкарбоновые кислоты, в том числе и салициловая кислота, участвуют в возникновении индуцированной устойчивости растений к патогенам и неблагоприятным условиям среды [2-7, 8] .

Однако данные о качественном и количественном составе фенолкарбоновых кислот в культивируемых клетках, таких как биомасса ряда культур тканей семейства Аралиевые в литературе практически отсутствуют. В связи с этим в нашем исследовании была проведена сравнительная оценка содержания некоторых фенолкарбоновых кислот в клетках культур тканей женьшеня обыкновенного, женьшеня американского и полисциас .

Экспериментальная часть Объектом работы служили культуры каллусных тканей растений Polyscias filicifolia полисциас, Panax ginseng женьшеня японского и Panax quinquefolium женьшеня американского. Культуры выращивали на стандартной агаризованной среде Мурасиге и Скуга, модифицированной Н.Ф .

Писецкой [9] при температуре 26+1 оС и относительной влажности воздуха 70% в темноте, с циклом культивирования 30-35 суток. После чего разрыхленную ткань весом около 5 г пересаживали на свежую питательную среду объемом 50 мл. Для проведения исследований использовали биомассу из 5-6 пассажей 20 суточного возраста .

Из сухой биомассы вышеуказанных культур получали вытяжки, содержащие сумму фенолкарбоновых кислот (ФКК) следующим образом: для удаления липофильных веществ навеску высушенной ткани обрабатывали хлороформом (1:3), полученный таким образом экстракт отбрасывали, шрот подвергали обработке этилацетатом в соотношении 1:5. Из полученного этилацетатного извлечения ФКК экстрагировали 3% водным раствором гидрокарбоната натрия. Полноту экстракции контролировали с помощью тонкослойной хроматографии [1, 10] .





Качественный анализ и оценка содержания некоторых ФКК проводилась методом ВЭЖХ на приборе «Миллихром 5.0» на колонке «Silasorb RP-18» размером 27.5 мм при температуре 35 оС, в системе ацетонитрил: 3% уксусная кислота в градиентном режиме, с использованием стандартных 16 _________ ©Бутлеровские сообщения. 2011. Т.26. №12. _________ г. Казань. Республика Татарстан. Россия .

ИЗУЧЕНИЕ ФЕНОЛКАРБОНОВЫХ КИСЛОТ КАЛЛУСНЫХ КУЛЬТУР ЛЕКАРСТВЕННЫХ… _________ 16-19 образцов. Расчет количеств ФКК проводился путем измерения площадей пиков с использованием калибровочного графика. В качестве маркеров для построения калибровочных кривых использовали хлорогеновую, ванилиновую, п-оксикоричную, феруловую, вератроновую и салициловую кислоты фирмы «Sigma» .

Представленные в данной работе результаты обрабатывали статистически. Результаты выражали в средних значениях со стандартным отклонением (SD). Для оценки различий между экспериментальными данными использовали критерий – непарный t-тест Стьюдента. Различия считали достоверными при уровне вероятности р 0.05 .

Результаты и их обсуждение Проведенные исследования показали, что биомасса каллусных культур тканей женьшеня японского содержит 24, женьшеня американского – 16 и полисцас – 21 вещество, которые по максимумам поглощения в УФ-свете и временам удерживания на колонке можно отнести к ФКК .

Полученные данные, по-видимому, указывают на достаточно высокую активность фенилпропаноидного пути биосинтеза фенольных соединений в исследованных культивируемых растительных клетках (рис. 1-3). Из выявленных соединений было идентифицировано 4, 6 и 6 фенолкарбоновых кислот, соответственно, у женьшеня японского, женьшеня американского и полисциас .

Рис. 1. Фенолкарбоновые кислоты растительных клеток культуры ткани P. ginseng (1 – хлорогеновая, 2 – ванилиновая, 3 – п-оксикоричная, 4 – вератровая кислоты) Кроме того, в исследуемых культурах была идентифицирована коричная кислота – главный промежуточный метаболит биосинтеза оксикоричных кислот, относящихся к ФКК, соответственно 310-5% в сухой биомассе женьшеня американского и женьшеня японского и 810-5% в культуре ткани полисциас .

Установлено, что культура ткани женьшеня японского не накапливает салициловую кислоту, но содержит незначительное количество вератровой кислоты, присутствия которой в составе остальных исследованных культур отмечено не было .

Кроме того, было установлено, что культура ткани женьшеня японского отличается гораздо более низким содержанием идентифицированных в нашем исследовании фенолкарбоновых кислот в суховоздушной биомассе по сравнению с культурами тканей женьшеня американского и полисциас (таблица) .

Как видно из таблицы, содержание салициловой кислоты в суховоздушной биомассе женьшеня американского и полисциас соответственно, составляет 0.0042% и 0.0023%, что в несколько раз превышает содержание в них других фенолкарбоновых кислот .

©Бутлеровские сообщения. 2011. Т.26. №12. _______________ E-mail: journal.bc@gmail.com _____________ 17 Полная исследовательская публикация ___________________________ Белых Ю.В. и Кириллова Н.В .

–  –  –

Согласно полученным нами данным содержание салициловой кислоты в суховоздушной биомассе женьшеня американского почти в 2 раза превышает ее содержание в суховоздушной биомассе культуры ткани полисциас. Однако, содержание других ФКК, таких как хлорогеновая, кофейная, ванилиновая, п-оксикоричная и феруловая в суховоздушной биомассе культуры ткани полисциас более чем в 2-3 раза превышает их содержание в суховоздушной биомассе женьшеня американского (таблица) .

18 _____________ http://butlerov.com/ _______________ ©Butlerov Communications. 2011. Vol.26. No.12. P.16-19 .

ИЗУЧЕНИЕ ФЕНОЛКАРБОНОВЫХ КИСЛОТ КАЛЛУСНЫХ КУЛЬТУР ЛЕКАРСТВЕННЫХ… _________ 16-19 Таблица. Содержание идентифицированных ФКК в культурах растительных клеток

–  –  –

Учитывая, что содержание коричной кислоты в суховоздушной биомассе женьшеня американского в 2.8 раза меньше, чем в суховоздушной биомассе клеток полисциас можно предположить, что, по-видимому, основным способом регуляции биосинтеза салициловой кислоты в каллусной культуре ткани женьшеня американского является ингибирование 4гидроксилазы коричной кислоты [11] .

Заключение Таким образом, в данном исследовании была проведена сравнительная характеристика качественного и количественного состава некоторых фенолкарбоновых кислот каллусных культур Panax ginseng, Panax quinquefolium и Polyscias filicifolia. В связи с тем, что функции ФКК и, в частности, СК в жизнедеятельности растений, как показывают полученные к настоящему времени данные литературы, индивидуальны и специфичны, поэтому продолжение работ в этом направлении может служить теоретической и практической основой для разработки систем адаптации растений к различным неблагоприятным факторам .

Выводы При определении компонентного состава фенолкарбоновых кислот биомассы каллусных культур двух видов женьшеня и полисциас, ранее не изученных, были идентифицированы хлорогеновая, кофейная, ванилиновая, п-оксикоричная, феруловая, салициловая и вератровая кислоты .

Литература [1] Запрометов М.Н. Образование и функции фенольных соединений в высших растениях. М. 1970 .

Т.31. №2 .

[2] Тарчевский И.А. Катаболизм и стресс у растений. М.: Наука. 1993. 80с .

[3] Тарчевский И.А., Чернов В.М. Молекулярные аспекты фитоиммунитета. Микология и фитопатология. 2000. Т.34. №3. С.1-10 .

[4] Тарчевский И.А. Сигнальные системы клеток растений. М.: Наука. 2002. 294с .

[5] Z. Chen, D.F. Klessig. Identification of a soluble salicylic acid-binding protein that may function in the signal transduction in the plant disease resistance response. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. Vol.88 .

No.18. P.8179-8183 .

[6] Z. Chen, H. Silva, D. Klessig. Oxygen species in the induction of plant systemic acquired resistance by salicylic acid. Sciens. 1993. Vol.262. No.10. P.1883-1886 .

[7] Z. Chen, J. Malamy, J. Henning, U. Conrath, P. Sanchez-Cassas, H. Silva, J. Ricigliano, D.F. Klessig .

Induction, modification and transduction of the salicylic acid signal in plant defense responses. Proc .

Natl. Acad. Sci USA. 1995. Vol. 92. No.24. P.4134-4137 .

[8] D.F. Klessig, J. Malamy. The salicylic acid signal in plants. Plant. Mol. Biol. 1994. Vol.26. No.5. P.1439Писецкая Н.Ф. К вопросу о подборе питальной среды для культуры ткани женьшеня .

Растительные ресурсы. 1970. Т.6. Вып.4. С.516-522 .

[10] Запрометов М.Н. Основы биохимии фенольных соединений. Учебн. пособие для биол .

специальностей ун-тов. М.: «Высш. школа». 1974. 280с .

[11] Guillaume A. Schoch, Georgi N. Nikov, William L. Alworth, Danie`le Werck-Reichhart. Chemical inactivation of the cinnamate 4-hydroxylase allows for the accumulation of salicylic acid in elicited cells. Plant Physiology. 2002. Vol.130. Р.1022-1031.




Похожие работы:

«Georgia Грузия Отдых в Грузии станет для Вас исключительным путешествием. Это страна древней культуры и многовековых традиций гостеприимства. Слово "гость" для грузина имеет особенное значение, поэтому поехать в Грузию просто необходимо, если вы устали от городской суеты....»

«М. А. Красногорцев Уральский федеральный университет Екатеринбург Деятельность организации "Yen" как пример сотрудничества меньшинств Европейского союза В статье проанализированы актуальные проблемы меньшинств Европейского союза на рубеже конца XX – начала XXI в. Основное внимание в рабо...»

«Д.С. Ермолин, А.А. Новик К ВОПРОСУ ИЗУЧЕНИЯ ПОХОРОННЫХ ОБРЯДОВ АЛБАНЦЕВ ПРИАЗОВЬЯ Данная статья является продолжением исследований авторами похоронной обрядности албанцев Украины. В частности, была опубликована статья по материалам экспедиции 2007 г. [Ермолин,...»

«МТ3 №001262 в Едином федеральном реестре туроператоров Вернадского просп., 37 к. 2, офис 112, Москва, 119415, Россия тел.: +7 495 938-92-92, +7 495 938-94-56; e-mail: ac@actravel.ru сайт: actravel.ru; facebook: actravel.ru; twitter: actravel_ru Аргентина Авторский тур Отдых в лоджах Аргентины Природа Аргентины во всей красе Эко-туры по А...»

«Республиканский учебно-методический центр по образованию Министерства культуры Республики Башкортостан предлагает к продаже программы, методическую и нотную литературу №№ Цена Наименование пп (руб.) Прим...»

«УТВЕРЖДЕНО Решением Президиума Общественной организации "Федерация бильярдного спорта Новосибирской области" Протокол № 01/15 от "27" января 2015 г. ПОЛОЖЕНИЕ О ПОРЯДКЕ ФОРМИРОВАНИЯ СБОРНЫХ КОМАНД НОВОСИБИРСКОЙ ОБЛАСТИ ПО БИЛЬЯРДНОМУ СПОРТУ Новосибирск 1. Общие положени...»

«BELARUSIAN STATE UNIVERSITY OF PHYSICAL CULTURE GYMNASTICS DEPARTMENT INTERNATIONAL COURSES “MODERN METHODS OF TRAINING AND PERFORMANCE” INTERNATIONAL TOURNAMENT “BSUPC UNIVERSITY OPEN CUP” in memory of Mikhail Tseytin (Acrobatic Gymnastics) November, 26 December, 2, 20...»

«как специфику социокультурной среды, так и характеристики включенного в организацию персонала. Список литературы: 1. Blake R., Mouton J. The Managerial Grid. Houston: Gulf.1994. 2. Камерон К., Куинн Р. Диагностика и изменение организационной культуры / Пер. с англ. под ред. И.В....»

«2 марта "Агротехнологии ХХI века. Реалии и перспективы развития" Время работы выставки 10.00 – 18.00 Выставочный павильон Cеминар-совещание по развитию КФХ в рамках заседания клуба 10.00 – 12.00 Зал Вега Агрознатоков. Организатор: Минсе...»







 
2019 www.librus.dobrota.biz - «Бесплатная электронная библиотека - собрание публикаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.